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Electroforesis de DNA en gel de agarosa
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Segunda práctica de laboratorio de biología molecular: Electroforesis de DNA en gel de agarosa. Con pasos complementarios como el análisis de espectrofotometría tanto del DNA del banano como el del humano. Aquí, algunas consideraciones finales: • La porosidad del gel de agarosa depende de la concentración del mismo en la solución de buffer TE. • Ya que el bromuro de etidio es un agente intercalante que interacciona con el ambiente hidrofóbico del DNA, fácilmente puede provocar mutaciones. • Al no extraer completamente los trozos de banano esto ocasiona un cambio en la curva normal de absorbancia de ácidos nucleicos en una muestra de DNA del mismo, evidenciando que existe una contaminación. • El DNA al poseer grupos fosfato cuenta con una carga negativa. Por lo tanto, al hacer la electroforesis debe tenerse en cuenta el tamaño y no la carga. • Cuando se tiene una relación de absorbancia (260 /280) menor que 2 existe contaminación con proteínas y si es mayor con fenol, cloroformo o carbohidratos. • Cuando se tiene una relación de absorbancia (260 /280) de aproximadamente 2 indica que contamos con una muestra pura. • Luego de la electroforesis y observar a través de la luz UV, el DNA del banano muestra una mayor migración debido a que este tiene un menor tamaño. • Si bien la absorbancia está relacionada a una concentración, no lo es como tal. • • Narración: David Romero • Fuentes: • -Electroforesis de DNA: http://facultad.bayamon.inter.edu/aml... • -Electroforesis de DNA: http://www.bioted.es/medio_electrofor... • -Electroforesis de proteinas: http://www.labespinosa.com/index-32.html • -Buffer de carga: http://usuarios.multimania.es/soporte... • -Electroforesis de proteinas: http://www.medmol.es/tecnicas/25/ • -Bromuro de Etidio : http://es.scribd.com/doc/3120628/LABO... • -Bromuro de Etidio y Electroforesis: http://www.uco.es/organiza/departamen... • -Electroforesis de DNA: http://www.ivic.ve/ecologia/ueg/forma... • -Electroforesis: http://batzerlab.lsu.edu/genomics/doc... • -Electroforesis de DNA: http://books.google.com.co/books?id=v... • -Genoma banano: http://news.bbc.co.uk/hi/spanish/scie...
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